產品介紹：

品名：革蘭氏染色液試劑盒

試劑盒組成：

1.結晶紫染色液：5ml×1支

2.碘液：5ml×1支

3.脫色液：5ml×2支

4.沙黃復染液：5ml×1支

原理:

通過結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙，因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

操作方法:

1.準備好革蘭氏染色所需試劑、玻片、吸水紙、鑷子、接種環、廢液缸、洗瓶、去離子水、酒精燈等，待檢測的菌株一般應為新鮮培養物；

2.以酒精擦拭玻片，在酒精燈上干燥后，用接種環挑取一環滅菌的去離子水或生理鹽水到載玻片上，挑取少量純培養物在水滴上涂抹至均勻分散，將涂片在酒精燈火焰上滅活、固定；

3.加結晶紫溶液1-2滴，染色1分鐘，用去離子水輕輕從培養物上方流過水洗；

4.待干，加革蘭氏碘液，作用1分鐘，用去離子水輕輕從培養物上方流過水洗；

5.加脫色液（95%酒精），不時搖動玻片，直至無紫色脫落為止（約10-20秒），用去離子水輕輕從培養物上方流過水洗；

6.待干，加復染液，復染30秒。用去離子水輕輕從培養物上方流過水洗，待玻片干燥后鏡檢；

7.油鏡鏡檢。菌體呈紫色者為革蘭氏陽性菌；呈紅色者為革蘭氏陰性菌。

注意事項:

1.培養物要新鮮，以免對結果的判斷造成影響；

2.酒精洗脫為關鍵步驟，不可長時間洗脫，以免對結果判斷造成影響；

3.碘液容易揮發，平時應擰緊瓶蓋、避光保存；

4.涂片可采用自然風干、干燥箱等方法進行干燥；

5.每一步水洗時，注意不要直接對著涂片沖洗，水流應從上方流經涂片，輕輕水洗。