血瓊脂平板的一些相關內容介紹

2021-12-06 13:05:18  微生物基本知識

血瓊脂平板是微生物檢驗的基礎,直接影響微生物檢驗的結果。合適的血瓊脂平板制備方法、儲存條件和質量控制試驗是提供高質量血瓊脂平板的保證。

微生物實驗室使用的血瓊脂平板可以按處方配制,也可以使用按處方生產的脫水血瓊脂平板。

制備時,應根據單獨配方的成分選擇或制備所需質量的平板。(應附處方和使用說明,按使用說明進行操作,確保質量符合要求,不得使用結塊或變色的脫水介質。)

脫水血瓊脂平板或單個配方成分應在適當的條件下儲存,如低溫、干燥和黑暗,所用容器應密封,尤其是盛放容器。市售成品血瓊脂平板除處方和使用說明外,還應注明有效期、儲存條件、質控菌和適用性檢驗試驗的使用。為了保證質量的穩定性和可靠性,每種脫水血瓊脂平板或配方成分都要準確稱量,要求有一定的準確度。

純凈水是常用的制備溶劑。應記錄每個稱重物體的重量和用水量。

用于制備的容器不應影響血瓊脂平板的質量,平板通常是玻璃容器。用于制備的容器和配套儀器應清潔,并用純凈水清洗,以消除清潔劑和異物的殘留。對于糖發酵血瓊脂平板等熱敏性血瓊脂平板,包裝容器一般應提前滅菌,確保無菌。

血瓊脂應完全溶解在水中,然后包裝和滅菌。制備時,如果需要加熱以幫助溶解,應注意不要過熱以避免血瓊脂平板顏色變深。如果需要添加其他成分,應充分混合。平板的滅菌應根據制造商提供或用戶驗證的參數進行。商業化的成品血瓊脂平板須附有所用滅菌方法的數據。

滅菌一般采用濕熱滅菌技術,特殊血瓊脂平板可采用膜過濾滅菌。

平板加熱和滅菌條件不當可能導致顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或PH值變化。因此,血瓊脂平板應通過驗證的滅菌程序進行滅菌,滅菌方法和條件應通過無菌試驗和促生長試驗進行驗證。此外,還應驗證高壓釜的蒸汽循環系統。保證一定加載方式下熱量的正常分配。溫度緩慢上升的高壓釜可能會導致血瓊脂平板過熱,過度滅菌可能會破壞大多數細菌和真菌血瓊脂平板的促生長質量。滅菌器中血瓊脂平板的體積和裝載方式也會影響加熱速度。因此,根據滅菌的特點,對滅菌程序進行全面驗證。測定每批平板滅菌后的PH值(冷卻至室溫25后測量)。如果處方中沒有列出PH值的范圍,PH值的范圍不能超過規定值0.2,除非驗證血瓊脂平板的PH值可以變化很大。制成平板或裝在試管中的血瓊脂平板應進行如下檢查。容器和蓋子不應破裂,內容物應相同,以盡可能避免形成氣泡。固體平板表面不應有裂紋或波紋,冷藏溫度下不應形成晶體,微生物不應被污染。應檢查并記錄批次數量、有效期和無菌檢查。