TSA平板培養的制備過程中需要注意的步驟

2021-11-05 10:48:58  微生物基本知識

在TSA平板培養的過程中,首先使用試管、三角瓶、培養皿、燒杯、吸管等玻璃器皿。 這些器皿在使用前須根據不同的情況,經過一定的處理,清洗干凈。 也進行包裝,滅菌等準備完畢后,有些可以使用,那么,下面一起了解下TSA平板培養的制備過程中需要注意的步驟吧!

1、新買的玻璃器皿

TSA平板培養去除包裝上的污垢后,請先用熱肥皂水刷洗,用流水沖洗,然后在1~2%的工業鹽酸中浸漬幾個小時,去除游離的堿性物質,用流水沖洗。 容量較大的容器,例如較大的燒瓶、量筒等,只要在清洗后注入少許濃鹽酸,旋轉容器使鹽酸附著在其內部表面,后傾幾分鐘除去鹽酸,用水沖洗,倒著放入清洗架,使水干燥即可

2、用過的玻璃器具

TSA平板培養未受病菌和病菌污染的器具,使用后可以隨時清洗,吸入化學試劑的吸管,可以先浸泡在清水中,達到一定量后再集中清洗。 可能被病原菌污染的器皿,須妥善消毒后,去污,用肥皂液沖洗,用流水沖洗。 未能用肥皂液清洗的容器,在清洗液中浸泡適當的時間后,用清水清洗。 洗滌液的主要成分是重鉻酸鉀和濃流酸,起到將有機物氧化成可溶性物質進行洗滌的作用。 清洗液有很強的腐蝕作用,使用時請注意不要接觸衣服、身體和其他東西。

一、類型

TSA平板培養實驗室制備的適合微生物生長和代謝產物積累的營養基質被稱為培養基(Media )。 由于各類微生物對營養的要求不同,培養目的和檢測需求不同,所以培養基種類很多。 我們可以根據某種標準,分為幾種類型。

1、根據是否完全了解培養基組成物質的化學成分來區別。 可分為天然、合成和半合成培養基。

1 )天然培養基是利用各種動物、植物或微生物的原料,很難正確地知道其成分。 主要原料有牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、面筋、各種面包粉、土豆、牛奶、血清等。 配合這些物質雖然不能準確知道其化學成分,但一般營養比較豐富,微生物生長旺盛,且來源廣泛,制備方便,所以比較常用,特別適合實驗室常用培養基的制備。 穩定性經常受到生產工廠和批號等的影響。

2 )合成培養基是完全知道化學成分和量的培養基,由已知化學成分的化學藥品制備。 此類培養基化學成分精確、重現性強,但價格高、微生物生長緩慢,僅適用于營養、代謝等科學研究。

3 )在合成培養基中加入某種天然成分或幾種天然成分; 或者在天然培養基中,加入一種或幾種已知成分的化學藥品,就成了半合成培養基。 例如土豆的蔗糖培養基等。 這種培養基在生產實踐和實驗室中使用多。2、按物理狀態劃分,可分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基。

1 )液體培養基呈液態,其中成分基本溶于水,無明顯固態物,液體培養基營養成分分布均勻,容易控制微生物的生長代謝狀態。

2 )向液體培養基中適量加入凝固劑,即可制成固體培養基。 常用的凝固劑有瓊脂、明膠、硅膠等,瓊脂常用,實際上應用非常廣泛。 在實驗室中,用于微生物的分離、鑒定、雜菌的檢測、計數、保存、生物測定等。

3 )向液體培養基中加入少量凝固劑后,變為半固體。 以瓊脂為例,其用量在0.2~1%之間。 這個培養基可以用來觀察微生物的動力,也可以用來保存菌種。

二、TSA平板培養制造的基本方法和注意事項

1、處方的選擇

同一培養基的配方在不同的作品中往往有一些差異。 因此,除須采用標準方法嚴格按照其規定配制外,一般都要盡量收集有關資料,進行比較核對,根據自己的使用目的進行選擇,并記錄其來源。

2、的制造記錄

每次制造都須有記錄。 包括名稱、配方及其來源、各成分的品種、最終的pH值、消毒的溫度和時間制造的日期和制造者等。 記錄復印一份,原記錄保存查閱,復印記錄與制作的培養基一起保管,以防混亂。

3、成分的稱呼

TSA平板培養培的各成分要準確稱量,注意防止錯亂,建議不要中斷,一次完成。 把處方放在一邊,每次計量完一個成分后在配方上做個記號,把需要的計量藥品一次性收集起來,放在左側,一個一個計量完之后移到右側也可以。 完全取完之后,須再檢查一次。

以上介紹的就是TSA平板培養的制備過程中需要注意的步驟,如需了解更多,可隨時聯系我們!